Mae osteoarthritis (OA) yn un o'r clefydau esgyrn a chymalau dirywiol cronig hirdymor sy'n effeithio ar y boblogaeth oedrannus dros 65 oed [
1]. Yn gyffredinol, mae cleifion OA yn cael diagnosis o gartilag wedi'i ddifrodi, synovium llidus, a chondrosytau wedi'u herydu, sy'n sbarduno poen a gofid corfforol [
2]. Mae poen arthritig yn cael ei achosi'n bennaf gan ddirywiad cartilag mewn cymalau oherwydd llid, a phan fydd y cartilag wedi'i ddifrodi'n ddifrifol gall esgyrn wrthdaro â'i gilydd gan achosi poen annioddefol a chaledi corfforol [
3]. Mae cyfranogiad cyfryngwyr llidiol gyda symptomau fel poen, chwydd ac anystwythder y cymal wedi'i ddogfennu'n dda. Mewn cleifion OA, mae cytocinau llidiol, sy'n achosi erydiad cartilag ac asgwrn isgondral, i'w cael yn yr hylif synovial [
4]. Dau brif gŵyn sydd gan gleifion OA yn gyffredinol yw poen a llid synovial. Felly prif nodau'r therapïau OA cyfredol yw lleihau poen a llid. [
5Er bod y triniaethau OA sydd ar gael, gan gynnwys cyffuriau ansteroidaidd a steroidaidd, wedi profi eu heffeithiolrwydd wrth leddfu poen a llid, mae gan ddefnydd hirdymor y cyffuriau hyn ganlyniadau iechyd difrifol megis camweithrediadau cardiofasgwlaidd, gastroberfeddol ac arennol [
6Felly, mae'n rhaid datblygu meddyginiaeth fwy effeithiol gyda llai o sgîl-effeithiau ar gyfer trin osteoarthritis.
Mae cynhyrchion iechyd naturiol yn dod yn fwyfwy poblogaidd am eu bod yn ddiogel ac yn hawdd eu cael [
7Mae meddyginiaethau traddodiadol Corea wedi profi effeithiolrwydd yn erbyn sawl clefyd llidiol, gan gynnwys arthritis [
8Mae Aucklandia lappa DC. yn adnabyddus am ei briodweddau meddyginiaethol, fel gwella cylchrediad qi ar gyfer lleddfu poen a thawelu'r stumog, ac fe'i defnyddiwyd yn draddodiadol fel analgesig naturiol [
9]. Mae adroddiadau blaenorol yn awgrymu bod gan A. lappa effeithiau gwrthlidiol [
10,
11], poenliniarydd [
12], gwrthganser [
13], a gastroamddiffynnol [
14] effeithiau. Mae gweithgareddau biolegol amrywiol A. lappa yn cael eu hachosi gan ei brif gyfansoddion gweithredol: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone a costuslactone [
15]. Mae astudiaethau cynharach yn honni bod costunolide wedi dangos priodweddau gwrthlidiol mewn lipopolysacarid (LPS), a oedd yn ysgogi'r macroffagau trwy reoleiddio NF-kB a llwybr protein sioc gwres [
16,
17]. Fodd bynnag, nid oes unrhyw astudiaeth wedi ymchwilio i weithgareddau posibl A. lappa ar gyfer trin OA. Mae'r ymchwil presennol wedi ymchwilio i effeithiau therapiwtig A. lappa yn erbyn OA gan ddefnyddio modelau cnofilod a achosir gan (monosodiwm-iodoasetad) MIA ac asid asetig.
Mae monosodiwm-ïodoasetad (MIA) yn cael ei ddefnyddio'n enwog i gynhyrchu llawer o ymddygiadau poen a nodweddion patholegegol OA mewn anifeiliaid [
18,
19,
20Pan gaiff ei chwistrellu i gymalau'r pen-glin, mae MIA yn tarfu ar fetaboledd y chondrocytau ac yn achosi llid a symptomau llidiol, fel erydiad cartilag ac esgyrn isgondral, sef prif symptomau OA [
18]. Ystyrir yn eang mai efelychiad o boen ymylol mewn anifeiliaid yw ymateb ysgwyd a achosir gan asid asetig lle gellir mesur y boen llidiol yn feintiol [
19Defnyddir llinell gelloedd macroffag llygoden, RAW264.7, yn boblogaidd i astudio'r ymatebion cellog i lid. Ar ôl eu actifadu gydag LPS, mae macroffagau RAW264 yn actifadu llwybrau llidiol ac yn secretu sawl canolwr llidiol, fel TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, ac IL-6 [
20Mae'r astudiaeth hon wedi gwerthuso effeithiau gwrth-nosiseptif a gwrthlidiol A. lappa yn erbyn OA mewn model anifeiliaid MIA, model anifeiliaid a achosir gan asid asetig, a chelloedd RAW264.7 wedi'u actifadu gan LPS.
2. Deunyddiau a Dulliau
2.1. Deunydd Planhigion
Cafodd y gwreiddyn sych o A. lappa DC. a ddefnyddiwyd yn yr arbrawf ei gaffael gan Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Corea). Fe'i hadnabuwyd gan yr Athro Donghun Lee, Adran Ffarmacoleg Lysieuol, Coleg Meddygaeth Corea, Prifysgol Gachon, a chafodd rhif y sbesimen taleb ei adneuo fel 18060301.
2.2. Dadansoddiad HPLC o Ddetholiad A. lappa
Echdynnwyd A. lappa gan ddefnyddio cyfarpar adlif (dŵr distyll, 3 awr ar 100 °C). Hidlwyd a chyddwyswyd y toddiant a echdynnwyd gan ddefnyddio anweddydd pwysedd isel. Roedd gan echdyniad A. lappa gynnyrch o 44.69% ar ôl sychu-rewi o dan −80 °C. Cynhaliwyd dadansoddiad cromatograffig o A. lappa gyda HPLC wedi'i gysylltu gan ddefnyddio system HPLC InfinityⅡ 1260 (Agilent, Pal Alto, CA, UDA). Ar gyfer gwahanu cromatograffig, defnyddiwyd colofn EclipseXDB C18 (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) ar 35 °C. Gwanhawyd cyfanswm o 100 mg o'r sbesimen mewn 10 mL o 50% methanol a'i soniceiddio am 10 munud. Hidlwyd samplau gyda hidlydd chwistrell (Waters Corp., Milford, MA, UDA) o 0.45 μm. Roedd cyfansoddiad y cyfnod symudol yn 0.1% asid ffosfforig (A) ac asetonitril (B) ac elwwyd y golofn fel a ganlyn: 0–60 munud, 0%; 60–65 munud, 100%; 65–67 munud, 100%; 67–72 munud, 0% toddydd B gyda chyfradd llif o 1.0 mL/mun. Arsylwyd yr alllif ar 210 nm gan ddefnyddio cyfaint chwistrellu o 10 μL. Perfformiwyd y dadansoddiad mewn tair copi.
2.3. Tai a Rheoli Anifeiliaid
Prynwyd llygod mawr gwrywaidd Sprague-Dawley (SD) 5 wythnos oed a llygod gwrywaidd ICR 6 wythnos oed gan Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). Cadwyd yr anifeiliaid mewn ystafell gan ddefnyddio tymheredd cyson (22 ± 2 °C) a lleithder (55 ± 10%) a chylch golau/tywyllwch o 12/12 awr. Ymgyfarwyddwyd yr anifeiliaid â'r cyflwr am fwy nag wythnos cyn i'r arbrawf ddechrau. Roedd gan yr anifeiliaid gyflenwad ad libitum o fwyd a dŵr. Dilynwyd y rheolau moesegol cyfredol ar gyfer gofal a thrin anifeiliaid ym Mhrifysgol Gachon (GIACUC-R2019003) yn llym ym mhob gweithdrefn arbrofol anifeiliaid. Cynlluniwyd yr astudiaeth yn ddall-ymchwilydd ac yn dreial cyfochrog. Dilynwyd y dull ewthanasia yn unol â chanllawiau'r Pwyllgor Moeseg Arbrofol Anifeiliaid.
2.4. Chwistrelliad a Thriniaeth MIA
Rhannwyd llygod mawr ar hap yn 4 grŵp, sef ffug, rheoli, indomethacin, ac A. lappa. Wedi'u hanestheteiddio â chymysgedd 2% o isofluorane O2, chwistrellwyd y llygod mawr gan ddefnyddio 50 μL o MIA (40 mg/m2; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, UDA) yn fewngyhyrol i gymalau'r pen-glin i arwain at OA arbrofol. Cynhaliwyd y triniaethau fel a ganlyn: cynhaliwyd grwpiau rheoli a ffug gyda diet sylfaenol AIN-93G yn unig. Dim ond y grŵp indomethacin a gafodd indomethacin (3 mg/kg) wedi'i ymgorffori yn neiet AIN-93G ac neilltuwyd grŵp 300 mg/kg A. lappa i ddeiet AIN-93G wedi'i ategu ag A. lappa (300 mg/kg). Parhaodd y triniaethau am 24 diwrnod ers diwrnod yr ysgogiad OA ar gyfradd o 15–17 g fesul 190–210 g o bwysau'r corff bob dydd.
2.5. Mesur Pwysau
Ar ôl sefydlu OA, perfformiwyd mesuriad capasiti dwyn pwysau aelodau ôl y llygod mawr gyda'r incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, UDA) fel yr amserlennwyd. Cyfrifwyd y dosbarthiad pwysau ar aelodau ôl: capasiti dwyn pwysau (%)
