Osteoarthritis (OA) yw un o'r clefydau esgyrn dirywiol cronig hirdymor sy'n effeithio ar y boblogaeth dros 65 oed [
1]. Yn gyffredinol, mae cleifion OA yn cael diagnosis o cartilag wedi'i ddifrodi, synovium llidus, a chondrocytes wedi erydu, sy'n sbarduno poen a thrallod corfforol [
2]. Mae poen arthritig yn cael ei achosi'n bennaf gan ddirywiad cartilag yn y cymalau gan lid, a phan fydd y cartilag wedi'i niweidio'n ddifrifol gall esgyrn wrthdaro â'i gilydd gan achosi poen annioddefol a chaledi corfforol [
3]. Mae cynnwys cyfryngwyr llidiol â symptomau fel poen, chwyddo ac anystwythder yn y cymal wedi'i ddogfennu'n dda. Mewn cleifion OA, mae cytocinau llidiol, sy'n achosi erydiad cartilag ac asgwrn is-gondral i'w cael yn yr hylif synofaidd [
4]. Dwy gŵyn fawr sydd gan gleifion OA yn gyffredinol yw poen a llid synofaidd. Felly prif nodau'r therapïau OA cyfredol yw lleihau poen a llid. [
5]. Er bod y triniaethau OA sydd ar gael, gan gynnwys cyffuriau ansteroidol a steroidal, wedi profi effeithiolrwydd o ran lleddfu poen a llid, mae gan ddefnyddiau hirdymor y cyffuriau hyn ganlyniadau iechyd difrifol fel camweithrediadau cardiofasgwlaidd, gastroberfeddol ac arennol.
6]. Felly, mae'n rhaid datblygu meddyginiaeth fwy effeithiol gyda llai o sgîl-effeithiau ar gyfer trin osteoarthritis.
Mae cynhyrchion iechyd naturiol yn dod yn fwyfwy poblogaidd am eu bod yn ddiogel ac ar gael yn hawdd [
7]. Mae meddyginiaethau Corea traddodiadol wedi profi effeithiolrwydd yn erbyn nifer o glefydau llidiol, gan gynnwys arthritis [
8]. Aucklandia lappa DC. yn adnabyddus am ei briodweddau meddyginiaethol, megis gwella cylchrediad qi ar gyfer lleddfu poen a lleddfu'r stumog, ac fe'i defnyddiwyd yn draddodiadol fel analgig naturiol [
9]. Mae adroddiadau blaenorol yn awgrymu bod gan A. lappa gwrthlidiol [
10,
11], analgesig [
12], gwrthganser [
13], a gastroprotective [
14] effeithiau. Mae gweithgareddau biolegol amrywiol A. lappa yn cael eu hachosi gan ei gyfansoddion gweithredol mawr: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone a costuslactone [
15]. Mae astudiaethau cynharach yn honni bod costunolide wedi dangos priodweddau gwrthlidiol mewn lipopolysaccharide (LPS), a ysgogodd y macroffagau trwy reoleiddio NF-kB a llwybr protein sioc gwres [
16,
17]. Fodd bynnag, nid oes unrhyw astudiaeth wedi ymchwilio i weithgareddau posibl A. lappa ar gyfer triniaeth OA. Mae'r ymchwil presennol wedi ymchwilio i effeithiau therapiwtig A. lappa yn erbyn OA gan ddefnyddio MIA (monosodiwm-iodoasetad) a modelau cnofilod a achosir gan asid asetig.
Mae monosodium-iodoacetate (MIA) yn cael ei ddefnyddio'n enwog i gynhyrchu llawer o'r ymddygiadau poen a nodweddion pathoffisiolegol OA mewn anifeiliaid [
18,
19,
20]. Pan gaiff ei chwistrellu i gymalau'r pen-glin, mae MIA yn amharu ar fetaboledd chondrocyte ac yn achosi llid a symptomau llidiol, fel cartilag ac erydiad esgyrn is-gondral, symptomau cardinal OA [
18]. Mae ymateb writhing a achosir gan asid asetig yn cael ei ystyried yn eang fel efelychiad poen ymylol mewn anifeiliaid lle gellir mesur y boen ymfflamychol yn feintiol [
19]. Defnyddir llinell gell macrophage y llygoden, RAW264.7, yn boblogaidd i astudio'r ymatebion cellog i lid. Ar ôl ei actifadu â LPS, mae macrophages RAW264 yn actifadu llwybrau llidiol ac yn secretu sawl cyfryngwr llidiol, fel TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, ac IL-6 [
20]. Mae'r astudiaeth hon wedi gwerthuso effeithiau gwrth-nociceptive a gwrthlidiol A. lappa yn erbyn OA mewn model anifeiliaid MIA, model anifeiliaid a achosir gan asid asetig, a chelloedd RAW264.7 a ysgogwyd gan LPS.
2. Defnyddiau a Dulliau
2.1. Deunydd Planhigion
Gwreiddyn sych A. lappa DC. a ddefnyddiwyd yn yr arbrawf ei gaffael gan Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea). Fe'i nodwyd gan yr Athro Donghun Lee, Adran Ffarmacoleg Lysieuol, Col. of Korean Medicine, Prifysgol Gachon, ac adneuwyd rhif sbesimen y daleb fel 18060301.
2.2. Dadansoddiad HPLC o Ddyfyniad A. lappa
Echdynnwyd A. lappa gan ddefnyddio cyfarpar adlif (dŵr distyll, 3 h ar 100 °C). Cafodd yr hydoddiant a echdynnwyd ei hidlo a'i gyddwyso gan ddefnyddio anweddydd pwysedd isel. Roedd gan echdynnyn A. lappa gynnyrch o 44.69% ar ôl rhewi-sychu o dan −80 °C. Cynhaliwyd dadansoddiad cromatograffig o A. lappa gyda HPLC wedi'i gysylltu gan ddefnyddio system HPLC 1260 InfinityⅡ (Agilent, Pal Alto, CA, UDA). Ar gyfer gwahaniad cromatig, defnyddiwyd colofn EclipseXDB C18 (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) ar 35 ° C. Gwanhawyd cyfanswm o 100 mg o'r sbesimen mewn 10 ml o 50% methanol a'i sonicated am 10 munud. Cafodd samplau eu hidlo â hidlydd chwistrell (Waters Corp., Milford, MA, UDA) o 0.45 μm. Cyfansoddiad y cyfnod symudol oedd 0.1% asid ffosfforig (A) ac acetonitrile (B) ac roedd y golofn yn aneglur fel a ganlyn: 0-60 min, 0%; 60–65 mun, 100%; 65–67 mun, 100%; 67–72 mun, 0% hydoddydd B gyda chyfradd llif o 1.0 mL/munud. Arsylwyd yr elifiant ar 210 nm gan ddefnyddio cyfaint pigiad o 10 μL. Perfformiwyd y dadansoddiad yn driphlyg.
2.3. Tai a Rheolaeth Anifeiliaid
Prynwyd llygod mawr gwrywaidd Sprague-Dawley (SD) 5 wythnos oed a llygod ICR gwrywaidd 6 wythnos oed oddi wrth Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). Roedd anifeiliaid yn cael eu cadw mewn ystafell gan ddefnyddio tymheredd cyson (22 ± 2 ° C) a lleithder (55 ± 10%) a chylchred golau / tywyll o 12/12 h. Bu'r anifeiliaid yn gyfarwydd â'r cyflwr am fwy nag wythnos cyn i'r arbrawf ddechrau. Roedd gan anifeiliaid gyflenwad ad libitum o borthiant a dŵr. Dilynwyd y rheolau moesegol cyfredol ar gyfer gofal a thrin anifeiliaid ym Mhrifysgol Gachon (GIACUC-R2019003) yn llym ym mhob gweithdrefn arbrofol anifeiliaid. Cynlluniwyd yr astudiaeth gan ymchwilydd-ddall a threial cyfochrog. Dilynwyd y dull ewthanasia yn unol â chanllawiau'r Pwyllgor Moeseg Arbrofol ar Anifeiliaid.
2.4. Chwistrelliad MIA a Thriniaeth
Gwahanwyd llygod mawr ar hap yn 4 grŵp, sef ffug, rheolaeth, indomethacin, ac A. lappa. Wedi'i anestheteiddio â chymysgedd isofluorane 2% O2, chwistrellwyd y llygod mawr gan ddefnyddio 50 μL o MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, UDA) yn fewn-articularly i'r cymalau pen-glin i arwain at OA arbrofol. Cynhaliwyd y triniaethau fel a ganlyn: dim ond gyda diet sylfaenol AIN-93G y cynhaliwyd grwpiau rheoli a ffug. Yn unig, darparwyd grŵp indomethacin ag indomethacin (3 mg/kg) wedi'i ymgorffori yn neiet AIN-93G a grŵp A. lappa 300 mg/kg wedi'i neilltuo i ddiet AIN-93G wedi'i ategu ag A. lappa (300 mg/kg). Parhawyd â'r triniaethau am 24 diwrnod ers diwrnod sefydlu OA ar gyfradd o 15-17 g fesul 190-210 g pwysau corff yn ddyddiol.
2.5. Mesur Cadw Pwysau
Ar ôl sefydlu OA, perfformiwyd mesur cynhwysedd pwysau breichiau o goesau ôl y llygod mawr gyda'r analluogrwydd-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) fel y trefnwyd. Cyfrifwyd y dosbarthiad pwysau ar goesau ôl: cynhwysedd cynnal pwysau (%)
